Aula prática dna da cebola

Discente_______________________________________ 28∕03∕2013 Aula Prática de Genética Geral Extração de DNA da cebola
Para a análise do DNA de celular eucarióticas, a primeira etapa é o seu isolamento. A extração de DNA de células eucariontes consta fundamentalmente de três etapas:
1º Ruptura (física e química) das membranas celulares para a liberação do material genético;
2º Desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos: DNA e proteínas;
3º Separação do DNA dos demais componentes celulares.
Objetivos
1. Obter ácido desoxirribonucléico (DNA) a partir de vegetais. 2. Visualizar o DNA isolado.
Materiais:
01-Faca
02-Béqueres de 250ml
03-Tubo de ensaio
01-Bastão de vidro
01-Funil de vidro
01-Suporte universal
01-Papel filtro
01-Banho-maria 60° C
Produtos/reagentes
01-Cebola picada
--Água filtrada
--Detergente
--NaCl (sal de cozinha)
--Álcool etílico gelado
--Gelo
Procedimento experimental 1. Com o auxílio de duas provetas, transfira 10ml de detergente e 20ml de água em um béquer de 250ml; 2. Com o auxílio de uma espátula, coloque uma pitada de sal nesse mesmo béquer e agite com um bastão de vidro; 3. Coloque a cebola picada nesse mesmo béquer (com a solução de lise-detergente), mexa bem e leve ao banho-maria por exatamente 15 minutos a 60°C; 4. Resfrie a mistura do banho-maria, colocando o béquer no gelo por cerca de 5 minutos, mexendo periodicamente; 5. Filtre a mistura, recolhendo o filtrado em um béquer limpo; 6. Transfira pequenas quantidades do filtrado em tubos de ensaio limpos e secos; 7. Adicione lentamente pela borda do tubo de ensaio o álcool etílico comercial gelado (aproximadamente o dobro do volume do filtrado). 8. Espere alguns minutos. Bolhas irão se formar e as moléculas de DNA vão precipitar;
Entenda o que acontece:
Depois que o procedimento é realizado é possível visualizar facilmente pequenos grumos esbranquiçados que são os filamentos