Apostila de biologia molecular

TÉCNICAS BÁSICAS
DE BIOLOGIA MOLECULAR

Sandra Regina Ceccato Antonini Silvana Perissatto Meneghin

Alfredo Seiiti Urashima

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COORDENADORES

• Profª Sandra Regina Ceccato Anto nini – Doutora no Depto.Tecnologia
Agroindustrial e Sócio-economia Rural, CCA/UFSCar, com pós-doutorado em genética molecular de lev eduras na Universidade de Sheffield, Inglaterra.

• Profª Silvana Perissatto Meneghin – Assistente no Depto.
Biotecnologia Vegetal, CCA/UFSCar, doutoranda em Microbiologia.

• Prof. Alfredo Seiiti Urashima - Doutor no Depto. Biotecnologia
Vegetal, CCA/UFSCar, com pós-doutorado em fitopatologia e biologia molecular na Univ ersidade de Kobe, Japão.

Esta apostila se refere ao curso de extensão universitária “Técnicas

básicas de biologia molecular”, oferecido no período de 12 a 16 de julho de

2004, no Laboratório de Microbiologia Agrícola e Molecular (LAMAM), Depto.

Biotecnologia Vegetal / Depto. Tecnologia Agroindustrial e Sócio-Economia

Rural, Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal de São Carlos.

Endereço: LAMAM - UFSCar Via Anhanguera, km 174 – Fone : (19) 3543-2612 / 3543-2614 13600-970 – Araras - SP e-mail: [e-mail]

Julho/2004

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INDICE

1. Introdução………………………………………………………………… 03

2. Segurança no laboratório e disposição de resíduos perigosos…… 03

3. Introdução à biologia molecular e marcadores moleculares……….. 05

4. Extração de DNA genômico total…………………………...………….. 24

5. Quantificação de DNA…………………………………………………... 26

6. Reação PCR……………………………………………………………... 29

7. Polimorfismo por RAPD………………………………………………… 33

8. Polimorfismo por RFLP………………………………………………… 37

9. Análise dos resultados………………………………………………… 45

10. Bibliografia………………………………………………………………. 48

11. Preparo de soluções…………………………………………………… 49