Apostila Bioquimica 2014
Departamento de Engenharia Química
Laboratório de Microbiologia Industrial
Bioquímica Industrial
Professor: Jenyffer Medeiros Campos
Glória Maria Vinhas
Recife, 2014
SUMÁRIO
Prática 1: Análise de proteínas: Características e pesquisa de aminoácidos em ovoalbumina. Prática 2: Ponto isoelétrico da caseína.
Prática 3: Produção de enzimas – Preparação de meio de cultivo.
Prática 4: Produção de enzimas (continuação) – Inoculação.
Prática 5: Produção de enzimas (continuação) – Fatores de afetam a estrutura e/ou desnaturam a enzima.
Prática 6: Determinação de açúcares redutores pelo método DNS
Prática 7: Metabolismo – Preparação de meio.
Prática 8: Metabolismo – Inoculação.
Prática 9: Metabolismo – Determinação de biomassa.
Prática 10: Caracterização de lipídeos.
Prática 11: Índice de saponificação.
PRÁTICA 1: ANÁLISE DE PROTEÍNAS: CARACTERÍSTICAS E
PESQUISA DE AMINOÁCIDOS EM OVOALBUMINA
Introdução
Proteínas são macromoléculas naturais com uma ou mais cadeias polipepetídicas, isto é, são polímeros de α-aminoácidos de configuração L. Constituem
50% ou mais de matéria seca celular, sendo fundamentais tanto ao aspecto estrutural como funcional. As proteínas podem ser separadas uma das outras e de outros tipos de moléculas através de métodos, que se baseiam em certas propriedades características, tais como solubilidade, massa molar, carga elétrica e afinidade por certos compostos. As proteínas podem ser também caracterizadas por reações de precipitação e coloração. Em condições fisiológicas, todas as moléculas de uma mesma proteína apresentam a mesma conformação, que é denominada nativa.
Ao preceder-se o isolamento e purificação de uma proteína, são introduzidas alterações físicas e químicas no seu meio ambiente que podem afetar sua estrutura espacial e ocasionar a perda da função biológica. A proteína é dita então desnaturada.
Vários fatores podem conduzir, à desnaturação, entre eles, o aquecimento, valores de pH muitos baixos ou