Análise de Morfologia Celular

MÉTODOS PARA INCLUSÃO DO MATERIAL EM RESINA

FIXAÇÃO: Deixar o material em Karnovsky de 4 a 24 horas.
LAVAGEM EM TAMPÃO FOSFATO: 3x cada uma com 10 minutos cada.
LAVAR COM ÁGUA DESTILADA: Lavar 3x rapidamente.
DESIDRATAÇÃO: Lavar com a série etílica de 10% a 100% sendo 30min no vácuo e 30min normal.
PRÉ-INFILTRAÇÃO: Colocar a solução de pré-infiltração ON e deixar 1h na bomba de vácuo.
INCLUSÃO: Colocar na resina e aguardar 24 horas.

METODOS PARA COLORAÇÕES DE MATERIAL VEGETAL
XYLIDINE PONCEAU pH 2,5 (Cora proteínas)
1.
2.
3.
4.

Corar 15 minutos com o corante;
Lavar com ácido acético (3%);
Lavar 2x em água destilada;
Secar e montar.

AZUL DE TOLUIDINA 0,025% pH 4,0 (Cora parede celular)
1. Corar 20 minutos com o corante;
2. Lavar rapidamente com água destilada;
3. Secar e montar.
COLORAÇÃO PELA REAÇÃO DE P.A.S. (Periodic Acid Schiff)
1.
2.
3.
4.
5.

Oxidar material em Ác. Periódico 0,5% por 9 minutos;
Lavar com água destilada e secar levemente;
Colocar o reativo de Schiff por 30 minutos no escuro;
Lavar com água sulfurosa, 3 banhos de 3 minutos cada;
Secar e montar.
SUDAN III – Cora lipídios
1. Devem ser realizados cortes a mão livre do material fresco ou fixado. Este corte deve ser colocado em etanol 50%.
2. Transferir os cortes para vidro de relógio e pingar sudan III sobre eles.
3. Cobrir o vidro de relógio para evitar evaporações e esperar de 20 a 30 minutos.
4. Os cortes devem ser lavados em álcool 80%.
5. Montar uma lâmina temporária com glicerina. (pingando uma gota de glicerina para fixar a lamínula na lâmina.

Laboratório de Biologia Celular Vegetal – UFC
Professora Dra Maria Izabel Gallão
Caderno de protocolo
Aluna: Aryelli Magalhães

PROTOCOLO PARA O PREPARO DE SOLUÇÕES

ÁGUA SUFUROSA (300 ml)

METABISSULFITO

HCl

270ml de água destilada +

1,5g metabissulfito +

2 ml HCl +

15 ml de HCl +

15ml de água destilada

22ml água destilada

15ml de metabissulfito

REATIVO DE SCHIFF