Amilase - relatorio aula pratica

Faculdade Pitágoras Ciências Biológicas

Relatório Prática 3 - Bioquímica

Belo Horizonte ABRIL 2013

OBJETIVO AULA PRATICA Nº 3.  Avaliar a ação da amilase salivar sobre o seu substrato (amido)



Verificar o efeito do PH sobre a atividade da amilase salivar

METODOLOGIA Foram adicionado 5 mL de amido, 2 mL de NaCl. - Adicionar ao primeiro tubo 2 mL de tampão acetato (pH 4,0); - Adicionar ao segundo tubo 2 mL de tampão fosfato (pH 6,8); - Adicionar ao terceiro tubo 2 mL de tampão glicina (pH 9,5); - Manter todos os tubos a temperatura ambiente por 5 minutos. Depois adicionar 0,5 mL da enzima (solução de saliva diluída) em cada um dos tubos contendo amido e tampões com pHs diferentes e agitar, após 5 minutos de reação, transferir 2 gotas para os seus respectivos tubos contendo IODO. Adicionar a todos os tubos contendo IODO 5 mL de água destilada.

DESENVOLVIMENTO

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Atividade da amilase salivar.

0,5 mL de saliva 5 mL de água destilada Reservar até o momento de uso Foi Preparado e separado 11 tubos de ensaio com numerações 1 á 10 ,um deles de B (Branco). Adicionou a todos os 11 tubos: 2 mL de água destilada e 2 gotas de lugol.Depois foram adicionados 0,5ml de saliva num tubo de ensaio nº 1 e após 1 minuto, retirou-se mais 2 gotas e adicionar ao TUBO 2 . Repetir

sucessivamente, em intervalos de 1 minuto, a transferência de 2 gotas para os tubos seguintes até o tubo que não se observe mais a coloração com o iodo (ponto acromático).  Resultado

No experimento, cada um dos tubos apresentou coloração de maneira uniforme, manteve a cor em torno de um azul escuro. Segundo a Professora Raquel, isso ocorreu porque havia pouca quantidade de amido na saliva do doador.  Efeito Fo pH sobre a atividade da amilase salivar.

Marcar 3 tubos de ensaio correspondentes a diferentes pHs (4,0; 6,8 e 9,5) e adicionar a todos: 2 mL de água destilada 2 gotas de lugol (reagente contendo iodo).  Resultado

No experimento, cada um dos tubos apresentou