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DUPLICAÇÃO DO DNADUPLICAÇÃO DO DNA
Como a estrutura do DNA transmite a informação genética?
DUPLICAÇÃO
Duplicação DNA:
• Molde (Template) criar uma macromolécula com uma única seqüência e função
• Fitas de DNA: complementares • Cada uma das fitas serve de molde para uma fita filha, com seqüência complementar e previsível
5´AAGGCTGA 3´
5´AAGGCTGA 3´
3´TTCCGACT 5´
3´TTCCGACT 5´
5´AAGGCTGA 3´
3´TTCCGACT 5´
Principais regras da duplicação: Modelo de duplicação do DNA proposto por Watson e Crick
DUPLICAÇÃO SEMI-CONSERVATIVA
Modelo Watson e CricK (semi-conservativa)
Cada dupla hélice filha: um filamento original + um recém sintetizado
Possíveis mecanismos duplicação DNA:
semi-conservativa
conservativa
dispersiva
Modelos de duplicação do DNA
semiconservativa
conservativ a dispersi va Meselson e Stahl (1958): demonstraram que o DNA se duplica de maneira semiconservativa
E.coli em meio: N15
N14
N14
Outras características duplicação
DNA:
semi-conservativa
metade descontínua
requer RNA iniciador
bidirecional
O processo de polimerização
Enzima que cataliza a polimerização dos nucleotídeos
DNA polimerase:
• adicionar desoxirribonucleotídeos à extremidade 3’
• utiliza um molde unifilamentar de DNA
• requer uma extremidade 3’OH livre
Síntese de DNA ocorre na direção 5’ 3’
Fita molde: 3’ 5’ e Fita nova 5’ 3’
Forquilha de replicação
Componentes necessários para a duplicação:
Principal enzima
DNA polimerase III
- catalisa a adição do nucleotídeo 3´na forquilha de duplicação
- adiciona nucleotídeos a uma cadeia já existente
Primers
Oligonucleotídeos de RNA sintetizados extremidade 3’OH livre - iniciadores da polimerização
Duplicação do filamento:
• contínua apenas primer inicial
• descontínua cada fragmento de Okazaki precisa de seu próprio primer Reação de alongamento da cadeia catalisada pela DNA polimerase III
A energia para a reação vem do rompimento da ligação de alta energia do fosfato do