02 RELAT RIO COLORA O DE GRAM ok

RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA

COLORAÇÃO DE GRAM

Bruna Leme Silva RA: 6668416052
Daniela de Oliveira Moraes RA: 6267237889
Evelyn de Almeida Maia RA: 6636351765
Mariângela S. T. Santos RA: 6665393032
Mayara Grassi RA: 7226570804

1. Limpar/ desinfectar bancada usando álcool 70%, é importante que a bancada fique bem seca para não correr o risco de pegar fogo.
2. Acender o fogo no bico de Bunsen, a melhor chama é na cor azul e sempre deve-se trabalhar com as mão atrás do fogo.
3. Coletar a amostra do meio de cultura utilizando alça de inoculação e esfregar a amostra na lâmina. É importante que antes e depois de utilizar a alça de inoculação deve-se flambar para que não tenha micro-organismo de outras espécies.
4. Fixar a amostra na lâmina, para isso é necessário passar a lâmina na chama tomando muito cuidado para que não estoure a mesma. Em seguida deixar esfriar.
5. Adicionar corante cristal violeta sobre a amostra por 1 minuto e remover o excesso.
6. Adicionar lugol por 1 minuto e remover o excesso.
7. Adicionar álcool-cetona por aproximadamente 10 segundos e remover o excesso com água corrente de baixo fluxo.
8. Adicionar o corante fucsina por 1 minuto e remover o excesso com água corrente de baixo fluxo
9. Deixar secar naturalmente

Os G+ tem a parede celular mais espessa que envolve a membrana plasmática e não possui membrana externa. Já os G- possuem membrana externa, que envolve a parede celular e assim protegendo a membrana plasmática.
O corante cristal violeta faz com que a parede celular fique roxa e o lugol fixa o corante nesta parede. Quando é adicionado o álcool-cetona na amostra, ele dissolve toda a membrana externa que é constituída de lipopolissacarídeos (lipídeo + carboidrato), deixando à mostra a próxima camada (parece celular). Logo em seguida é adicionado o corante fucsina, que faz com que a parede celular fique rosa. Conclusão: Se na amostra for detectada a presença de micro-organismos roxos ele será do tipo G+ e se for detectada a presença