SEPARAÇÃO DAS PROTEINAS DO SORO DE COELHO POR ELE-TROFORESE EM ACETATO DE CELULOSE

SEPARAÇÃO DAS PROTEINAS DO SORO DE COELHO POR ELETROFORESE EM ACETATO DE CELULOSE Trabalho realizado por: Grupo nº 4 FCUL, 22 de março de 2013 1. Resumo Nesta atividade laboratorial realizou-se a separação das proteínas do soro de coelho pelo método de eletroforese (técnica de eletroforese de zona onde se utiliza uma matriz sólida saturada de solução tampão como suporte, neste caso acetato de celulose). A técnica de eletroforese é habitualmente utilizada em bioquímica como meio auxiliar de diagnóstico e baseia-se no facto de diferentes proteínas possuirem carga e massa diferentes pelo que podem ser separadas por ação de um campo elétrico. As proteínas que se pretendiam separar eram as seguintes: a albumina e as globulinas (α1, α2, β e γ). Desta maneira, esperar-se-ia que a tira eletroforética apresentasse 5 bandas distintas, correspondentes aos 5 grupos de proteínas presentes maioritariamente no soro de coelho. A albumina é a proteína que existe em maior concentração no plasma e é a que tem uma massa molecular relativa mais baixa. As globulinas são uma mistura heterogénea e complexa de proteínas que possuem diferentes designações com base na sua mobilidade eletroforética. Após retirar as tiras do tampão e realizar a eletroforese procedeu-se à coloração dos resultados em corante Ponceau S que lhes conferiu uma tonalidade rosada. Seguidamente, as tiras foram passadas por ácido acético 5% (v/v) em metanol para retirar o excesso de corante e fixar as…

proporcionada por sistemas tampão. • O citoplasma da grande maioria das células contem altas concentrações de proteínas, contendo muitos aminoácidos com grupos funcionais que são ácidos fracos ou bases fracas. O sistema tampão garante que o valor fisiológico de pH mantenha-se constante. • O valor de pH é regulado por substâncias tampão e por processos fisiológicos, que incluem o processo respiratório, que é imediato, e um processo mais lento que é o renal. Os sistemas…

INTRODUÇÃO Neste relatório será abordada a experiência feita em laboratório sobre o sistema-tampão e PH de uma amostra de água deionizada e uma solução aquosa tamponada com ácido acético, onde posteriormente iremos adicionar HCL e NAOH verificando novamente o ph para determinarmos se houve algum tipo de alteração e depois será feito a solução TRIS e o ajuste do ph deste tampão para 7,0. Incialmente, o sistema tampão é capaz de impedir grandes variações de PH e é constituído por um…

INTRODUÇÃO Sistema tampão Um sistema tampão é formado por um ácido fraco e sua base conjugada. Tampões são sistemas aquosos que resistem as variações do pH quando quantidades relativamente pequenas de ácido (H+) ou base (OH-) são adicionados a solução. Os tampões são misturas de ácidos fracos de Bronsted (doadores de H+) e suas bases conjugadas (aceptoras de H+), os quais podem captar ou liberar H+ conforme o meio se torne ácido ou básico. MATERIAS E MÉTODOS Primeira parte…

WESTERN BLOTTING (LCM-FMRP-USP) 1) Tampão RIPA (manter em gelo durante utilização; adicionar o inibidor de protease e fosfatase no tubo falcon; verificar se há estoque – Tris, NaCl, EDTA e detergentes).  Para 50 ml de Tampão Tris = 0,3025 g NaCl = 0,4383 g EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acético) = 18,61 mg Detergentes: Triton X-100 = 500 μl Deoxiglicolato = 500 mg SDS = 50 mg Inibidores protease: Aprotinina = 250 μg PMSF (phenylmethyl sulfonyl fluoride) = 8,71 mg…

a capacidade de tamponamento (ou "poder tampão") é uma propriedade importante em sistemas biológicos, para os quais uma alteração rápida de pH pode ter consequências desastrosas Nesse trabalho veremos os mecanismos utilizados pelo corpo para a regulação do pH. Tendo como os mais importantes tampões fisiológicos presentes no organismo: bicarbonato/gás carbônico , hemoglobina/oxihemoglobina, proteínas ácidas/ proteínas básicas e fosfato monoacido/ fosfato diácido. 2.…

que é Solução Tampão? É uma solução que atenua a variação dos valores de pH, mantendo-o aproximadamente constante. São formadas por um ácido fraco e um sal desse ácido ou por uma base fraca e um sal dessa base. Químicos utilizam tampões toda vez que necessitam manter o pH de uma solução em um nível constante e pré-determinado. No corpo humano as soluções tamponantes são responsáveis pelo funcionamento biológico que depende criticamente do pH. Em destaque, o sistema tamponante mais…

enzimas, proteínas, carboidratos, lipídeos, ácidos nucleicos, hormônios, vitaminas, dentre outros - são trabalhadas nessadisciplina. Também é destaque a importância biológica e propriedades físico-químicas da água, além dos sistemas-tampão e pH. Quanto ao metabolismo, o enfoque é dado no que se diz respeito à produção eutilização de energia pelos seres vivos: glicólise, ciclo de Krebs, síntese e oxidação de ácidos graxos, metabolismo de compostos nitrogenados, cadeia transportadora de…

ADSORÇÃO DE PROTEÍNAS DO SANGUE NA SUPERFÍCIE DE BIOMATERIAIS Resumo Biomaterial é uma substância ou uma mistura de substâncias, natural ou artificial, que atua nos sistemas biológicos (tecidos, órgãos) parcial ou totalmente, com o objetivo de substituir, aumentar ou tratar.Alguns exemplos de biomateriais são próteses, implantes, lentes de contato e marcapassos. Biomaterias possuem uma intensa utilização clinica,e uma dessas utilizações é na aera de formulação farmacêutica.…

Sistemas de tamponamento no organismo animal Bicarbonato Hemoglobina Fosfato Proteínas O sistema- tampão bicarbonato consiste de ácido carbônico (HCO3) e é responsável pela manutenção do PH no sangue, o plasma sanguíneo é tamponado em parte por esse sistema. O PH do sistema- tampão bicarbonato depende da concentração de H2CO3 e HCO-3, o doador e o aceptor de prótons, respectivamente, nos animais com pulmões o PH está ao redor de 7,4. O sistema bicarbonato do sangue está quase…